マーク・ヘラースタインM.D., Ph.D.
カリフォルニア大学バークレー校

マウスCDモデルの初代肝細胞における代謝変化と酸化還元操作の影響-パイロット研究

ここでは、CD-G3PDHmダブルKOマウスモデルから単離した初代肝細胞を用いた一連のパイロット研究を提案する。この二重ノックアウトモデルにおいて、生体外肝細胞培養が代謝フラックスへの影響や 酸化還元を変化させる介入に対する反応を確実に定量化できるかどうかを検討する。ここでの主な目的は、初代肝細胞が代謝の変化や酸化還元を標的とした介入に対する反応を調べるのに有用かどうかを示すことであり、具体的には、肝細胞の表現型、CDの表現型、トランスフェクトされた遺伝子の表現型が維持されるかどうかを明らかにすることである。安定同位体-質量分析法の進歩により、肝デノボ脂肪新生、糖新生、グリセロン新生、細胞質アセチル-CoAおよびトリオース-リン酸生成速度の質量同位体分布分析による測定、2H標識基質から体水への重水素喪失による肝特異的解糖/糖新生、長鎖および中鎖FA酸化の測定など、重要な疑問をin vivoで解決できるようになった。さらに、細菌性NADHオキシダーゼ(LbNOX)を発現させることにより、細胞内のNADHを散逸させる強力な手段を探索する。これらのパイロット研究により、初代肝細胞を用いることで、肝臓におけるCDの基本的代謝結果をよりよく理解できることを実証したいと考えている。 .

(Updated November 2023)